https://wiki-de.moshellshocker.dns64.de/index.php?action=history&feed=atom&title=Supercritical_Angle_FluorescenceSupercritical Angle Fluorescence - Versionsgeschichte2026-06-07T11:58:12ZVersionsgeschichte dieser Seite in Wikipedia (Deutsch) – Lokale KopieMediaWiki 1.43.8https://wiki-de.moshellshocker.dns64.de/index.php?title=Supercritical_Angle_Fluorescence&diff=1332279&oldid=previmported>TaxonBot: Bot: Auflösung doppelter toter Links nach https://de.wikipedia.org/w/index.php?title=Wikipedia:Bots/Anfragen&oldid=266185123#Aufl%C3%B6sung_der_doppelten_Toten_Links2026-04-17T14:08:38Z<p>Bot: Auflösung doppelter toter Links nach https://de.wikipedia.org/w/index.php?title=Wikipedia:Bots/Anfragen&oldid=266185123#Aufl%C3%B6sung_der_doppelten_Toten_Links</p>
<p><b>Neue Seite</b></p><div>'''Supercritical Angle Fluorescence (SAF)''' (dt.: [[Fluoreszenz]] oberhalb des [[Kritischer Winkel|kritischen Winkels]]) ist eine Methode der [[Mikroskopie]] zur [[Fluoreszenzspektroskopie|fluoreszenzspektroskopischen]] Untersuchung biochemischer Spezies und Strukturen ([[Proteine]], [[DNA]], [[Zelle (Biologie)|Zellen]], Gewebe). Die getrennte Erfassung der oberhalb des kritischen Winkels abgestrahlten Fluoreszenz ermöglicht die spezifische Untersuchung des Kontaktbereichs der Probe mit dem Tragglas ([[Objektträger]], [[Deckglas]]).<br />
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== SAF-Detektion ==<br />
[[Datei:polarplotsaf.png|mini|hochkant=1.5|SAF Emission an der Wasser/Glas Grenzfläche]]<br />
Das [[Abstrahlungsverhalten]] [[Fluoreszenz|fluoreszierender]] [[Molekül]]e wird bei großer Nähe zu [[Grenzfläche]]n zwischen [[dielektrisch]]en [[Lichtwellenleiter]]n verschiedener [[Brechungsindex|Brechungsindizes]] stark beeinflusst.<ref>W. Lukosz, R. Kunz: Light emission by magnetic and electric dipoles close to a plane interface. I. Total radiated power. J. Opt. Soc. Am. 67, 1607–1614 (1977).</ref><ref>W. Lukosz, R. Kunz: Light emission by magnetic and electric dipoles close to a plane interface. II. Radiation patterns of perpendicular oriented dipoles. J. Opt. Soc. Am. 67, 1615–1619 (1977).</ref> Bei der Mikroskopie an biologischen Proben befindet sich der fluoreszierende [[Analyt]] zumeist in einem wässrigen Medium ([[Brechungsindex]] <math>n_0=1{,}33</math>) auf einem [[Deckglas]] (<math>n_1=1{,}52</math>). Der kritische Winkel <math>\theta_{\mathrm c}</math> der Wasser/Glas Grenzfläche beträgt ca. 61°. Fluoreszenzfarbstoffe mit einem Abstand zur Glasoberfläche von mehr als einer [[Wellenlänge]] emittieren kein Licht oberhalb von <math>\theta_{\mathrm c}</math> ins Glas. Bei kleineren Abständen, besonders im Bereich bis 300&nbsp;nm, kommt es zur Entstehung von SAF, d.&nbsp;h. zur Fluoreszenzemission oberhalb des kritischen Winkels. Somit führt die getrennte Sammlung von SAF zu einer hohen Spezifität des Detektionsvolumens für die Grenzfläche.<ref>J. Enderlein, T. Ruckstuhl, S. Seeger: Highly efficient optical detection of surface-generated fluorescence. Appl. Opt. 38, 724–732 (1999).</ref><br />
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Die unter großen Winkeln auftretende SAF-Emission übersteigt das Fassungsvermögen herkömmlicher auf [[Brechung (Physik)|Lichtbrechung]] basierter Linsensysteme. Die vollständige Erfassung der SAF-Emission wird mit einem Lichtwellenleiter der die SAF-Emission durch [[Totalreflexion]] an seiner parabolischen Mantelfläche zu einem parallelen [[Strahlenbündel]] kollimiert.<ref>T. Ruckstuhl, S. Seeger: Light detecting optical device, US6714297, EP1076823, WO9946596 (1998).</ref> Diese in der Forschungsgruppe von [[Stefan Seeger]] entwickelte Detektionstechnik bildet die Grundlage der SAF-Mikroskopie, aber auch die von [[Biosensor]]en und Nachweissystemen für die medizinische Diagnostik.<ref>T. Ruckstuhl, M. Rankl, S. Seeger: ''Highly efficient biosensing using a supercritical angle fluorescence (SAF) instrument'', In: ''[[Biosens Bioelectron]]''. 18, 1193–1199 (2003).</ref><ref>A. Krieg, S. Laib, T. Ruckstuhl, M. Rankl, S. Seeger: ''Fast detection of single nucleotide polymorphisms (SNPs) by primer elongation with monitoring of supercritical-angle fluorescence'', In: ''[[ChemBioChem]]'' 5, 1680–1685 (2004).</ref><br />
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== SAF-Mikroskop ==<br />
Für die SAF-Mikroskopie wird ein spezielles Mikroskopobjektiv verwendet, das einen parabolischen [[Lichtleiter]] sowie ein Linsensystem hoher numerischer [[Apertur]] beinhaltet. Das innere Linsensystem dient der Anregung der Probe und der Sammlung unterhalb des kritischen Winkels abgestrahlter Fluoreszenz, der äußere parabolische Lichtleiter zur Sammlung von SAF. Die getrennte, simultane Messung der oberhalb und unterhalb von <math>\theta_{\mathrm c}</math> abgestrahlten Fluoreszenz ermöglicht die parallele Mikroskopie mit zwei verschiedenen Auflösungen entlang der optischen Achse.<ref>T. Ruckstuhl, D. Verdes: Supercritical angle fluorescence (SAF) microscopy, Opt. Express 12, 4246–4254 (2004).</ref><ref>D. Verdes, T. Ruckstuhl, S. Seeger: Parallel two-channel near- and far-field fluorescence microscopy J. Biomed. Opt. 12, 34012 (2007).</ref><br />
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== Einzelnachweise ==<br />
<references /><br />
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== Weblinks ==<br />
* [http://www.pci.uzh.ch/ Website des Institutes für Physikalische Chemie an der Uni Zürich]<br />
* {{Toter Link |datum=2018-03-07 |url=http://www.safmicroscopy.com/index.htm |text=SAF microscopy homepages}}<br />
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[[Kategorie:Lichtmikroskopie]]<br />
[[Kategorie:Laseranwendung]]</div>imported>TaxonBot