imported>Ghilt: /* Geschichte */ + Trichoplusia ni Medium-Formulation Hink

2023-06-07T19:01:10Z

Geschichte: + Trichoplusia ni Medium-Formulation Hink

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{{Weiterleitungshinweis|Sf9|Zur südkoreanischen Boygroup siehe [[SF9]].}}
[[Bild:SF9.JPG|mini|Sf-9-Zellen in serumfreien Medium]]
'''Sf-9''' ist eine [[Immortalisierung|immortalisierte]] [[Insekten]]-[[Zelllinie]] aus [[Eierstock|Ovar]]-[[Zelle (Biologie)|Zellen]] von ''[[Spodoptera frugiperda]]'', einer [[Nachtfalter]]art, die zur Familie der [[Eulenfalter]] (Noctuidae) und zur Ordnung der [[Schmetterlinge]] (Lepidoptera) zählt. Diese wird in der Biotechnologie zur Produktion von [[Rekombinantes Protein|rekombinanten]] [[Protein]]en verwendet.

== Kultivierung ==
Die Sf-9-Zellen sind robuste, wenig scherstressempfindliche Zellen, die in [[Zellkultur]]en [[Zelladhäsion|adhärent]] sowie in [[Suspensionszellkultur|Suspension]] wachsen. Ihre optimale Kultivierungstemperatur liegt um 27 °C, bei einem optimalen [[pH-Wert]] von 6,2. Sie lassen sich gut in serumfreien Medien kultivieren, wobei in der Regel eine um ca. zehnmal höhere Aminosäurekonzentration als bei vergleichbaren Medien für Säugerzellen enthalten ist.

== Verwendung ==
[[Bild:SF9-AcMNPV.JPG|mini|Sf-9-Zellen, 96 h nach Infektion mit Baculoviren (AcMNPV)]]
Sf-9 (sowie verwandte Zellen wie z. B. Sf-21) und Tn-5 (genauer BTI-Tn-5B1-4, auch High Five<sup>®</sup>) aus ''Trichoplusia ni'' werden heutzutage fast ausschließlich für die Produktion von rekombinanten Proteinen durch [[Insektenzellkultur]] verwendet. Dabei macht man sich zunutze, dass diese Zellen leicht mit [[Baculovirus|Baculoviren]] (z. B. AcMNPV) infiziert werden können. Das Genom des Virus kann relativ einfach so verändert werden, dass es für das gewünschte Protein codiert (meist unter Kontrolle des viralen Polyhedrin-Promotors). Nach Infektion der Sf-9-Zellen mit diesen Viren werden die Zellen dazu angeregt, große Mengen des rekombinanten Proteins zu synthetisieren. Da die veränderten Viren für höhere Eukaryoten völlig ungefährlich sind, können diese Arbeiten unter relativ geringen Sicherheitsvorkehrungen durchgeführt werden. Weitere Vorteile gegenüber anderen Expressionssystemen sind:
*Insektenzellen sind im Vergleich zu z. B. HeLa-Zellen relativ billig und sehr einfach zu kultivieren
*Sie führen anders als ''E. coli'' und Hefen fast alle posttranslationalen Proteinmodifikationen durch, d. h. die gewonnenen Proteine sind den menschlichen sehr ähnlich
*dadurch besitzen die Proteine fast immer eine sehr gute Löslichkeit (im Gegensatz zu rekombinanten Proteinen aus ''E. coli'', die häufig unlöslich sind, da dieses Bakterium keine dem Menschen vergleichbaren posttranslationalen Modifikationen durchführen kann und weiterhin nur ein sehr einfaches Chaperonsystem besitzt)

== Geschichte ==
Sf-9-Zellen stammen aus dem [[Eierstock|Ovargewebe]] von ''Spodoptera frugiperda'', entnommen während des Puppenstadiums. Dies geschah 1977 über eine Zwischenkultivierung der IPLB-Sf21AE-Zelllinie.<ref>Vaughn, J.L. ''et al.'' (1977): ''The establishment of two cell lines from the insect Spodoptera frugiperda (Lepidoptera; Noctuidae).'' In: ''In Vitro.'' Bd. 13, S. 213–217. PMID 68913.</ref> Aus einem [[Klonen|Klon]], d. h. den Nachfahren einer Zelle IPLB-Sf21AE wurden Sf-9-Zellen isoliert.

W.F. Hink von der Ohio State University entwickelte 1991 ein [[Zellkulturmedium|serumfreies Medium]] ([[Trichoplusia ni Medium-Formulation Hink]]), mit dem Sf-9-Zellen kultiviert werden können und in dem die Herstellung von rekombinanten Proteinen genauso gut gelingt wie in Kulturen, die mit dem üblichen serumhaltigen Medium angezogen werden.<ref>Hink, W.F. (1991): ''A serum-free medium for the culture of insect cells and production of recombinant proteins.'' In: ''In Vitro Cell. Dev. Biol.'' Bd. 27, S. 397–401. PMID 1906456</ref>

== Einzelnachweise ==
<references/>

== Weblinks ==

* [[Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen|DSMZ]]: [http://www.dsmz.de/human_and_animal_cell_lines/info.php?dsmz_nr=125 Sf9]
* [https://www.cellosaurus.org/CVCL_0549 Eintrag in Cellosaurus]

[[Kategorie:Zelllinie]]

Sf-9-Zellen - Versionsgeschichte

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