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2024-06-16T07:19:42Z

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'''Recombineering''' (englisch von ''recombi''nogenic engi''neering'') bezeichnet eine molekularbiologische Methode zur Manipulation von [[Desoxyribonukleinsäure|DNA]], basierend auf der [[Homologe Rekombination|homologen Rekombination]] von ''[[Escherichia coli]]'', die unter dem Synonym '''Red/ET Rekombination''' bekannt ist.

Recombineering basiert auf der [[Homologe Rekombination|homologen Rekombination]], die von [[Protein]]en, die aus [[Bakteriophagen]] stammen, in ''[[Escherichia coli]]'' vermittelt wird. Zwei homologe Systeme sind bekannt. Das RecE/RecT des Rac-Prophagen und das ''red''-[[Operon]] bestehend aus Redγ, Redβ und Redα vom [[Bakteriophage Lambda|Bakteriophagen λ]]. Beide Systeme erlauben den effizienten und exakten Austausch frei wählbarer DNA-Abschnitte zwischen zwei unterschiedlichen DNA-Molekülen. Das ''red''-Rekombinationssystem wird dabei am häufigsten verwendet. Der Austausch von DNA erfolgt über zwei dem Zielfragment flankierende homologe (ähnliche oder identische) Bereiche mit einer Länge von 30 bis 50 Bp.

== Vorteile ==
Recombineering kann als eine Weiterentwicklung der konventionellen [[Klonierung]] betrachtet werden, die durch die Verwendung der homologen Rekombination unabhängig von [[Restriktionsenzyme]]n funktioniert. Deshalb ist diese Methode besonders geeignet für die Manipulation großer [[Vektor (Gentechnik)|Vektoren]] (> 100 [[Basenpaar|kBp]]) wie z. B. [[Bacterial Artificial Chromosome]]s (BACs). Recombineering erlaubt die gewünschten Modifikationen ohne zusätzliche DNA-Fragmente zu hinterlassen.

== Literatur ==
* Zhang et al.: ''A new logic for DNA engineering using recombination in Escherichia coli.'' In: ''[[Nature Genetics]].'' (1998) vol. 20 (2) S. 123–128.
* Muyrers et al.: ''Rapid modification of bacterial artificial chromosomes by ET-recombination.'' In: ''[[Nucleic Acids Res.]]'' (1999) vol. 27 (6) S. 1555–1557.
* Ellis et al.: ''High efficiency mutagenesis, repair, and engineering of chromosomal DNA using single-stranded oligonucleotides.'' In: ''[[Proc Natl Acad Sci USA]].'' (2001) vol. 98 (12) S. 6742–6746.
* Muyrers et al.: ''Techniques: Recombinogenic engineering – new options for cloning and manipulating DNA.'' In: ''[[Trends Biochem Sci]].'' (2001) vol. 26 (5) S. 325–331.
* Copeland et al.: ''Recombineering: a powerful new tool for mouse functional genomics.'' In: ''[[Nat Rev Genet]].'' (2001) vol. 2 (10) S. 769–779.
* Court et al.: ''Genetic engineering using homologous recombination.'' In: '' [[Annu Rev Genet]].'' (2002) vol. 36 S. 361–388.

[[Kategorie:Genetik]]
[[Kategorie:Molekularbiologie]]
[[Kategorie:Nukleinsäure-Methode]]

Recombineering - Versionsgeschichte

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