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2021-06-25T08:59:44Z

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Die '''Magnet Assisted Transfection''' (engl. 'Magnet-unterstützte Transfektion', kurz ''MATra'', auch ''Magnetofektion'') ist eine biochemische [[Transfektion]]smethode, die unter Ausnutzung eines magnetischen Feldes [[Nukleinsäure]]n in Zielzellen einschleust. Dabei werden eisenhaltige, magnetische Nanopartikel mit DNA beladen, die diese auf Grund ionischer Wechselwirkungen binden. Ein magnetisches Feld leitet die Nanopartikel in Richtung der Zielzellen und in diese hinein. Dort wird die DNA freigegeben.<ref>F. Scherer, M. Anton, U. Schillinger, J. Henke, C. Bergemann, A. Krüger, B. Gänsbacher, C. Plank: ''Magnetofection: enhancing and targeting gene delivery by magnetic force in vitro and in vivo.'' In: ''Gene therapy.'' Band 9, Nummer 2, Januar 2002, S. 102–109, {{ISSN|0969-7128}}. {{DOI|10.1038/sj.gt.3301624}}. PMID 11857068.</ref>

== Eigenschaften ==
Die Magnetofektion wird zum Einschleusen von [[Nukleinsäure]]n in [[Zelle (Biologie)|Zellen]] verwendet, z. B. bei der Erzeugung [[transgen]]er Organismen.<ref>C. Plank, M. Anton, C. Rudolph, J. Rosenecker, F. Krötz: ''Enhancing and targeting nucleic acid delivery by magnetic force.'' In: ''Expert opinion on biological therapy.'' Band 3, Nummer 5, August 2003, S. 745–758, {{ISSN|1471-2598}}. {{DOI|10.1517/14712598.3.5.745}}. PMID 12880375.</ref> Dabei werden [[DNA]], [[siRNA]], [[dsRNA]], [[shRNA]], [[mRNA]] oder [[Oligonukleotid]]e über ihre negativen [[Ladung (Physik)|Ladungen]] an magnetische Partikel gebunden, welche zuvor mit [[kation]]ischen [[Lipid]]en oder [[Polymer]]en beschichtet wurden.<ref>L. Mair, K. Ford, M. d. Alam, R. Kole, M. Fisher, R. Superfine: ''Size-uniform 200 nm particles: fabrication and application to magnetofection.'' In: ''Journal of biomedical nanotechnology.'' Band 5, Nummer 2, April 2009, S. 182–191, {{ISSN|1550-7033}}. PMID 20055096. {{PMC|2818021}}.</ref> Die mit Nukleinsäuren beladenen magnetischen Partikel werden auf eine [[Zellkultur]] gegeben, um anschließend durch Anlegen eines [[Magnetfeld]]es die [[Adsorption]] der Nukleinsäuren an die Zellen und in Folge deren Aufnahme per [[Endocytose]] und [[Pinocytose]] zu verstärken.<ref>J. I. Schwerdt, G. F. Goya, M. P. Calatayud, C. B. Hereñú, P. C. Reggiani, R. G. Goya: ''Magnetic field-assisted gene delivery: achievements and therapeutic potential.'' In: ''Current gene therapy.'' Band 12, Nummer 2, April 2012, S. 116–126, {{ISSN|1875-5631}}. PMID 22348552.</ref>

Magnetische Nanopartikel, die als Träger von Nukleinsäuren verwendet werden, bestehen meist aus [[Eisenhydroxide]]n<ref>Plank, C., Schillinger, U., Scherer, F., Bergemann, C., Remy, J. S., Krötz, F., Anton, M., Lausier, J. and Rosenecker, J. (2003) Biol.
Chem., 384, 737-747.</ref>. Diese werden durch [[Fällung]] von eisenhaltigen Säure-Lösungen durch Zugabe der entsprechenden [[Basen (Chemie)|Basen]] gewonnen. Die Nanopartikel haben eine Größe von ca. 100 nm und sind zudem meist mit einem biologisch abbaubaren [[Polymer]] beschichtet. Das Polymer versieht die Oberfläche der Eisenpartikel mit einer positiven Ladung, welche wichtig für die ionische Wechselwirkung mit der DNA ist.

Die positiv geladenen Magnetpartikel binden die negativ geladene DNA. Die Komplexbildung erfolgt
relativ schnell. Im Anschluss werden die beladenen Eisenpartikel mit den Zielzellen auf einer magnetischen Platte inkubiert. Das magnetische Feld bewirkt, dass die Eisenpartikel auf die Oberfläche der Zellmembran der Zielzellen gelangen. Jene nehmen die Partikel dann durch [[Endozytose]] oder [[Pinozytose]] auf. In der Zelle angekommen wird die DNA freigegeben und die magnetischen Partikel akkumulieren in [[Endosomen]] und/oder [[Vakuolen]] und werden mit der Zeit in den normalen, zellulären [[Eisenmetabolismus]] überführt. In den meisten Fällen führt die erhöhte Eisenkonzentration im Medium zu keinerlei zytotoxischen Effekten.

Die Magnet Assisted Transfection ist eine zeitsparende und relativ neue Technologie zum Einschleusen von DNA in eine Zielzelle. Besonders effizient ist dabei die Transfektion von adhärenten Säugetierzellen und Primärzelllinien, aber auch Suspensionszellen und Zellen anderer Organismen können erfolgreich transfiziert werden.
Einen großen Vorteil dieser Methode stellt der schonende Umgang mit Zellen dar. Andere Methoden sind limitiert durch die möglichen zytotoxischen Effekte des lipidischen Transfektionsreagenz ([[Lipofektion]]) oder durch direkte Gewalteinwirkung auf die Zellen ([[Elektroporation]], 20–50 % tote Zellen). Des Weiteren erhöht sich in vielen Fällen durch den gerichteten Transport der Magnetpartikel die Transfektionseffizienz, gerade bei geringen DNA Mengen. Verfahren wie die Lipofektion liefern hier nur eine statistische Chance eines Aufeinandertreffens von Vektor und Zielzelle. Die Magnet Assisted Transfection benötigt kein [[Fetales Kälberserum|Serum]]-freies Medium für eine erfolgreiche Transfektion, was einen weiteren Vorteil bietet.

Derzeit (Stand 2009) sind über 150 verschiedene [[Zelllinie]]n und [[Primärzelle]]n<ref>[http://www.iba-go.com/naps/naps_fr02_04.html iba-go.com]</ref> erfolgreich mit dieser Methode transfiziert worden. Weitere synergistische Effekte der Transfektionseffizienz können sich durch die Kombination von Lipofektion und Magnet Assisted Transfection ergeben.

Diese auf Nanotechnologie basierende Transfektionsmethode bietet möglicherweise in Zukunft eine Alternative zu den derzeit genutzten viralen und nicht-viralen Vektoren für ''in vivo'' Gen-Transfer und Gen-Therapie.<ref>Davis, M. E. (2002) ''Curr. Opin. Biotechnol.'', 13(2), 128-131</ref>

Alternativen zum Gentransfer per Magnetofektion sind die Transfektion mit [[Polyethylenimin]], die [[Lipofektion]], die [[Elektroporation]], die [[Genkanone]], die [[Sonoporation]], die [[Mikroinjektion]] und die [[Viraler Vektor|viralen Vektoren]].<ref>A. J. Mellott, M. L. Forrest, M. S. Detamore: ''Physical non-viral gene delivery methods for tissue engineering.'' In: ''Annals of biomedical engineering.'' Band 41, Nummer 3, März 2013, S. 446–468, {{ISSN|1573-9686}}. {{DOI|10.1007/s10439-012-0678-1}}. PMID 23099792.</ref>

== Einzelnachweise ==
<references />

[[Kategorie:Gentechnik]]
[[Kategorie:Biochemisches Trennverfahren]]
[[Kategorie:Transfektion]]

Magnet Assisted Transfection - Versionsgeschichte

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