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2022-01-04T22:15:12Z

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[[Datei:MTT Plate.jpg|mini|[[Mikrotiterplatte]] eines MTT-Assays]]
Der '''MTT-Test''' ist ein Test zur Bestimmung der metabolischen Aktivität von Zellen. Da diese unter bestimmten Bedingungen stark mit der [[Zellviabilität]] korreliert, wird der MTT-Test häufig genutzt, um diese zu evaluieren.

== Prinzip ==
[[Zelle (Biologie)|Zellen]] werden [[in vitro]] mit dem namensgebenden [[Farbstoff]], einem gelben [[Tetrazoliumsalz]], behandelt, um ihre Lebensfähigkeit beziehungsweise den Anteil lebender Zellen im Vergleich zu einer Kontrollprobe von Zellen zu messen. Dies ist beispielsweise nach [[Testung]] einer giftigen Substanz notwendig.

Der Nachweis der Zellvitalität mittels MTT-Test beruht auf der [[Reduktion (Chemie)|Reduktion]] des gelben, wasserlöslichen Farbstoffs 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid (MTT) in ein blau-violettes, wasserunlösliches [[Formazan]]. Früher wurde angenommen, dass MTT durch mitochondriale [[Succinat]]-Dehydrogenasen reduziert wird, Untersuchungen in den letzten Jahren legen jedoch nahe, dass die Reduktion hauptsächlich von den pyridinhaltigen Reduktionsäquivalenten [[Nicotinamidadenindinukleotidphosphat|NADH]] und [[Nicotinamidadenindinukleotidphosphat|NADPH]] und nur teilweise von Succinat abhängig ist. Die Menge des umgesetzten und letztendlich gemessenen Farbstoffs entspricht damit der [[Glykolyse]]rate der Zellen per se und ist somit weniger ein Maß für die [[Zellatmung]] (wie früher angenommen). Die Reduktion von MTT durch NADH und NADPH ist abhängig von [[Enzym]]en des [[Endoplasmatisches Retikulum|Endoplasmatischen Retikulums]] (ER). Die partielle Reduktion von MTT durch Succinat in den [[Mitochondrium|Mitochondrien]] dagegen ist abhängig von dem Enzym [[Succinat-Dehydrogenase]] (mitochondrialer Komplex II).

[[Datei:MTT reaction.svg|zentriert|600px]]

== Literatur ==
* T. Mosmann: ''Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxicity assays.'' In: ''Journal of Immunological Methods.'' Band 65, 1983, S. 55–63. PMID 6606682.
* M. V. Berridge, A. S. Tan, K. D. McCoy, R. Wang: ''The Biochemical and Cellular Basis of Cell Proliferation Assays That Use Tetrazolium Salts.'' In: ''Biochemica'', 1996. [https://lifescience.roche.com/wcsstore/RASCatalogAssetStore/Articles/BIOCHEMICA_96_4_p14-19.pdf lifescience.roche.com] (PDF)
* M. V. Berridge, A. S. Tan: ''Characterization of the Cellular Reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT): Subcellular Localization, Substrate Dependence, and Involvement of Mitochondrial Electron Transport in MTT Reduction.'' In: ''[[Archives of Biochemistry and Biophysics]]'', Band 303, 1993, S. 474–482.

[[Kategorie:Biochemische Nachweisreaktion]]

MTT-Test - Versionsgeschichte

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