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<p><b>Neue Seite</b></p><div>[[Datei:Ligation.png|thumb|Ligation bei Fremd-DNA-Einbau in Plasmid]]Unter '''Ligation''' versteht man in der [[Molekularbiologie]] die enzymkatalysierte Verknüpfung zweier DNA- oder RNA-Segmente an ihren Enden. Dabei wird das 3'-Hydroxy-Ende mit dem 5'-Phosphat-Ende der [[Nukleinsäure|Nukleinsäurensegmente]] mit Hilfe des [[Enzym]]s [[Ligasen|Ligase]] durch Ausbildung einer [[Phosphodiesterbindung]] verbunden. Der Vorgang gilt als essentiell für alle Lebewesen, da er ein wichtiger Schritt bei der [[Replikation]] und der [[DNA-Reparatur]] ist.<ref name="PMID4377758">I. R. Lehman: ''DNA ligase: structure, mechanism, and function.'' In: ''[[Science]].'' Band 186, Nummer 4166, November 1974, S.&nbsp;790–797, {{DOI|10.1126/science.186.4166.790}}, PMID 4377758 (Review).</ref> <br />
<br />
Die Entdeckung der Ligase in den Laboratorien von M. Gellert, I. R. Lehman, C. C. Richardson, and J. Hurwitz im Jahr 1967 war ein Durchbruch für die Molekularbiologie.<ref name="PMID19329793">S. Shuman: ''DNA ligases: progress and prospects.'' In: ''[[Journal of Biological Chemistry]].'' Band 284, Nummer 26, Juni 2009, S.&nbsp;17365–17369, {{DOI|10.1074/jbc.R900017200}}, PMID 19329793, {{PMC|2719376}} (Review).</ref> Anwendung findet die Ligation zum Beispiel beim [[Klonieren]]. „Fremde“ [[Desoxyribonukleinsäure|DNA]] wird dabei in ein [[Plasmid]] eingebracht. Das Plasmid wird dazu mit [[Restriktionsenzym|Restriktionsenzymen]] geschnitten (linearisiert). Die ebenfalls lineare fremde DNA wird zusammen mit dem geschnittenen Plasmid und einer Ligase, in den meisten Fällen [[T4-DNA-Ligase]], inkubiert, wobei die Enden jeweils miteinander kovalent verknüpft werden. <br />
<br />
Seltener werden auch zwei [[Ribonukleinsäure|RNA]]-Moleküle miteinander durch Ligation verknüpft. Um die Ausbeute zu steigern wird häufig ein sogenannter ''DNA-splint'' verwendet, der zu den Enden der beiden RNAs komplementär ist und diese so in räumliche Nähe bringen kann.<ref name="PMID23065567">C. J. Kershaw, R. T. O'Keefe: ''Splint ligation of RNA with T4 DNA ligase.'' In: ''Methods in molecular biology.'' Band 941, 2012, S.&nbsp;257–269, {{DOI|10.1007/978-1-62703-113-4_19}}, PMID 23065567, {{PMC|4234903}}.</ref> Diese Art der Ligation wird nach den Autoren der Erstbeschreibung, M. J. Moore und [[Phillip Allen Sharp|P. A. Sharp]], häufig als ''Moore-Sharp DNA-splinted RNA ligation'' bezeichnet.<ref name="DOI10.1126/science.1589782">M. Moore, P. Sharp: ''Site-specific modification of pre-mRNA: the 2'-hydroxyl groups at the splice sites.'' In: ''Science.'' 256, 1992, S.&nbsp;992, {{DOI|10.1126/science.1589782}}.</ref><br />
== Quellen ==<br />
* [[Bruce Alberts|Alberts]], Bray, Johnson, Lewis: ''Lehrbuch der molekularen Zellbiologie, 2., korrigierte Auflage'' Wiley-VCH, Weinheim 2001, ISBN 3-527-30493-2.<br />
* R. Wehner, [[Walter Gehring|W. Gehring]]: ''Zoologie, 23. neu bearbeitete Auflage''; Georg-Thieme-Verlag Stuttgart, New York 1995, ISBN 3-13-367423-4<br />
<br />
== Einzelnachweise ==<br />
<references /><br />
<br />
[[Kategorie:Molekularbiologie]]<br />
[[Kategorie:Nukleinsäure-Methode]]<br />
[[Kategorie:Gentechnik]]</div>imported>ZabesBot