imported>Peter Gröbner: „Nicht verlinkt werden … Verlagsnamen …“ (Wikipedia:Zitierregeln#Grundformat)

2025-06-13T10:28:02Z

„Nicht verlinkt werden … Verlagsnamen …“ (Wikipedia:Zitierregeln#Grundformat)

Neue Seite

Der '''Kaiser-Test''' ist ein Test, der unter anderem in der [[Merrifield-Synthese|Festphasen-Peptidsynthese]] (SPPS) und in der organischen Festphasensynthese (SPOS) zur Umsatzkontrolle gebräuchlich ist. Hier können recht empfindlich und mit einfachen Mitteln freie [[Aminogruppe]]n detektiert werden.

== Beschreibung ==
Der Kaiser-Test besteht aus drei Reagenzlösungen.

* [[Kaliumcyanid]] in einer [[Wasser|wässrigen]] [[Pyridin]]-Lösung
* [[Ninhydrin]] '''1''' in [[N-Butanol|''n''-Butanol]] oder [[Ethanol]]
* [[Phenol]] in ''n''-Butanol oder Ethanol

Bei Anwesenheit von freien Aminogruppen und damit einer unvollständigen Peptidkupplung färbt sich die Lösung nach dem Erwärmen auf etwa 100 °C tief violett und kann optisch aber auch spektroskopisch ausgewertet werden. Bei einer vollständigen Peptidkupplung wird die Lösung gelb.<ref>{{Literatur | Autor=[[Emil Thomas Kaiser]], Robert L. Colescott, Charles D. Bossinger, Paul I. Cook | Titel=Color Test for Detection of Free Terminal Amino Groups in the Solid-Phase Synthesis of Peptides | Sammelwerk=[[Analytical Biochemistry]] | Band=Bd. 34 | Nummer=2 | Jahr=1970 | Seiten=595–598 | ISSN=0003-2697 | DOI=10.1016/0003-2697(70)90146-6}}</ref> Der Kaiser-Test kann auch quantitativ durchgeführt werden.<ref>{{Literatur | Autor=Virender K. Sarin, [[Stephen B. H. Kent|Stephen B. H. Kent]], [[James P. Tam]], [[Robert Bruce Merrifield]] | Titel=Quantitative monitoring of solid-phase peptide synthesis by the ninhydrin reaction | Sammelwerk=Analytical Biochemistry | Band=Bd. 117 | Nummer=1 | Jahr=1981 | Seiten=147–157 | ISSN=0003-2697 | DOI=10.1016/0003-2697(81)90704-1}}</ref>

Bei der Anwesenheit von freien Aminogruppen '''2''' muss der Kupplungsschritt wiederholt werden, denn das Endcapping der freien Aminogruppen würde zum einen die Ausbeute an Peptid deutlich verringern und zum anderen die Reinigung des gewünschten Peptides durch kurzkettigere Peptide als Verunreinigungen erschweren.<ref>{{Literatur | Autor= | Herausgeber=Weng C. Chan, Peter D. White | Titel=Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis | TitelErg=A Practical Approach | Auflage=1. | Verlag=Oxford University Press | Ort=Oxford/New York | Jahr=2000 | ISBN=0-19-963724-5 | Seiten=}}</ref>

Der Kaiser-Test beruht chemisch auf der [[Ninhydrin-Probe]].
[[Datei:Kaiser-Test Reaktionsschema V5.svg|zentriert|rahmenlos|hochkant=3|Kaiser-Test Reaktionsschema]]
Der so gebildete Farbstoff wird ''Ruhemanns Blau'' '''3''' genannt. Die Farbigkeit von '''3''' beruht u. a. auf einem ausgedehnten System [[Konjugierte Doppelbindungen|konjugierter Doppelbindungen]] in und zwischen den beiden aromatischen Ringen, was durch die nachfolgende Abbildung visualisiert werden soll:

[[Datei:AS-Ninhydrin-Farbstoff-Isomerie V2.svg|zentriert|rahmenlos|hochkant=2|AS-Ninhydrin-Farbstoff-Isomerie]]

Die Aminosäuren [[Serin]], [[Asparagin]], [[Asparaginsäure]] und [[Prolin]] als [[N-Terminus|''N''-terminale Aminosäure]] ergeben kein eindeutiges Ergebnis im Kaiser-Test.<ref>{{Literatur | Autor=James Darrell Fontenot, Judith Marchand Ball, Margaret A. Miller, Chaya M. David, Ronald C. Montelaro | Titel=A survey of potential problems and quality control in peptide synthesis by the fluorenylmethoxycarbonyl procedure | Sammelwerk=Peptide Research | Band=Bd. 4 | Nummer=1 | Jahr=1991 | Seiten=19–25 | DOI=}}</ref>

== Einzelnachweise ==
<references />

== Weblinks ==
* [http://www.stjuderesearch.org/guy/docs/pepprotocol_2.pdf Festphasenpeptidsynthese] (PDF; 350 kB)
* [http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Fluka/Datasheet/60017dat.Par.0001.File.tmp/60017dat.pdf Datenblatt bei Sigma-Aldrich] (PDF; 69 kB)

[[Kategorie:Biochemische Nachweisreaktion]]

Kaiser-Test - Versionsgeschichte

imported>Peter Gröbner: „Nicht verlinkt werden … Verlagsnamen …“ (Wikipedia:Zitierregeln#Grundformat)