https://wiki-de.moshellshocker.dns64.de/index.php?action=history&feed=atom&title=GensondeGensonde - Versionsgeschichte2026-06-07T11:37:32ZVersionsgeschichte dieser Seite in Wikipedia (Deutsch) – Lokale KopieMediaWiki 1.43.8https://wiki-de.moshellshocker.dns64.de/index.php?title=Gensonde&diff=273356&oldid=previmported>Wosch21149: Szintillation verlinkt2025-03-19T13:58:39Z<p>Szintillation verlinkt</p>
<p><b>Neue Seite</b></p><div>'''Gensonden''' sind Poly- oder [[Oligonukleotide]] (meistens einsträngige oder doppelsträngige [[DNA]], seltener [[Ribonukleinsäure|RNA]]), die eine komplementäre Basensequenz zum gesuchten [[Gen]] aufweisen und sich an die passende [[DNA-Sequenz]] einer (immobilisierten) DNA anlagern können.<br />
Die Stabilität der Anlagerung hängt von der Übereinstimmung der DNA-Sequenzen, dem [[GC-Gehalt]] und der Länge der Gensonden bzw. Anzahl der hybridisierten Basen ab. Durch intensives Waschen können alle nicht perfekt homologen Sequenzen wieder getrennt werden, um nur Signale bei exakten Übereinstimmungen zu bekommen.<br />
<br />
DNA-Sonden werden durch [[Phosphoramidit-Synthese]], [[Random Priming]], [[Polymerase-Kettenreaktion|Polymerase-Kettenreaktion (PCR)]], [[Nick translation]], [[Desoxyribonukleotidyltransferase|Tailing]] oder [[T4-Polynukleotidkinase|Phosphorylierung]] erzeugt. RNA-Sonden, auch Ribosonden (engl. riboprobe) genannt, werden durch [[In-vitro-Transkription]] hergestellt.<br />
<br />
Gensonden sind zum Zwecke des Aufspüren oder Detektierens mit Markermolekülen verbunden. Zum Direktnachweis mit radioaktiven Isotopen (<sup>32</sup>P, <sup>35</sup>S) oder [[Fluoreszenz]]farbstoffen, zum indirekten Nachweis über Mittlermoleküle etwa [[Biotin]] über [[Streptavidin]] oder [[Antikörper]] für [[Digoxigenin]]. An die „Mittlermoleküle“ sind je nach weiteren Detektionsverfahren entweder (Fluoreszenz-)Farbstoffe oder Enzyme gekoppelt. Häufig verwendete Enzyme hierfür sind die [[Alkalische Phosphatase]] oder [[Peroxidase]].<br />
<br />
Gensonden werden entweder detektiert direkt durch Nachweis der [[Ionisierende Strahlung|ionisierenden Strahlung]] ([[Autoradiographie]] oder [[Szintillation (Strahlungsphysik)|Szintillation]]), oder der entsprechenden Farbstoffe (Fluoreszenzmikroskopie, Photometrie) oder indirekt durch Enzymsubstratreaktion, bei denen entweder [[Chemolumineszenz]], Farbstoffumschlag oder [[Fällung|Farbstoffpräzipitation]] erzeugt wird. Der Nachweis der Markermoleküle (direkt oder indirekt) gilt als Nachweis der spezifischen Gensonde und damit auch der zu analysierenden DNA oder RNA, mit welcher die Sonde hybridisiert hat.<br />
<br />
== Anwendung ==<br />
Gensonden finden Einsatz in der Genomanalyse und [[Expressionsanalyse]]. Typische Anwendung in der Genomanalyse sind der [[Southern Blot]] und die [[Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung]] zur [[Chromosomenanalyse]]. Beispiele für die Anwendung in der Expressionsanalyse sind der [[Northern Blot]], der [[Protection Assay|RNase protection assay]] und die [[In-situ-Hybridisierung]] zum Nachweis von mRNA.<br />
<br />
== Siehe auch ==<br />
* [[Blotting]]<br />
* [[Molekülmarkierung]]<br />
<br />
== Literatur ==<br />
* [[Friedrich Lottspeich]], Haralabos Zorbas: ''Bioanalytik''. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg 1998, ISBN 978-3-8274-0041-3.<br />
* Cornel Mülhardt: Der Experimentator: ''Molekularbiologie/Genomics.'' Sechste Auflage. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg 2008, ISBN 3-8274-2036-9.<br />
* [[Joseph Sambrook|J. Sambrook]], [[Thomas Maniatis|T. Maniatis]], D. W. Russel: ''Molecular cloning: a laboratory manual.'' 3rd edition (2001), [[Cold Spring Harbor Laboratory]] Press. ISBN 0-87969-577-3.<br />
<br />
[[Kategorie:Nukleinsäure]]<br />
[[Kategorie:Molekularbiologie]]<br />
[[Kategorie:Nukleinsäure-Methode]]<br />
[[Kategorie:Biochemisches Nachweisverfahren]]</div>imported>Wosch21149