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2024-09-20T19:01:58Z

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[[Datei:Dideoxyadenosine triphosphate.svg|mini|Didesoxyadenosintriphosphat, ddATP]]
'''Didesoxyribonukleosid-Triphosphate''' ('''ddNTP''') sind artifizielle DNA-[[Nukleotid]]e, die bei der [[DNA-Sequenzierung]] nach [[Frederick Sanger|Sanger]] Verwendung finden.<ref>F. Sanger et al.: ''DNA sequencing with chain-terminating inhibitors.'' In: ''Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.'', 1977, 74(12), S. 5463–5467; PMID 271968; {{PMC|431765}}.</ref> Die ddNTPs sind wie die [[Desoxyribonukleosid-Triphosphate]] (dNTPs) aufgebaut. Allerdings ist die [[Ribose]] (Zucker) an Position 2’ und 3’ desoxidiert. Dadurch fehlt am 3'-Kohlenstoff-Atom die [[Hydroxygruppe]], an der bei der Polymerisation das nächste Nukleotid angehängt wird.

Baut die [[DNA-Polymerase]] während der Replikation an einer Stelle ein solches ddNTP ein, so kann kein weiteres Nukleotid angehängt werden und die Polymerisation bricht an dieser Stelle ab. Man kann deshalb vereinfacht von Stopp-Nukleotiden sprechen.

[[Datei:Didesoxy-Methode.svg|mini|Prinzip der DNA-Sequenzierung nach der Didesoxy-Methode]]

Bei der [[DNA-Sequenzierung#Didesoxymethode nach Sanger|DNA-Sequenzierung nach Sanger]] werden nun die vier ''natürlichen'' dNTPs und eines der vier ''artifiziellen'' ddNTPs zu einem [[Polymerase-Kettenreaktion|PCR]]-Ansatz mit der zu sequenzierenden DNA und einem entsprechenden [[Primer]] gegeben. Die Polymerase baut nun gelegentlich in statistischer Verteilung ein ddNTP ein, wodurch die Polymerisation abbricht. Es entsteht somit ein Gemisch unterschiedlich langer Stücke des zu sequenzierenden Abschnitts der DNA. Man führt dieses Experiment mit allen vier ddNTPs durch und trägt die vier Ansätze in einer [[Polyacrylamid-Gelelektrophorese]] nebeneinander auf. Aus dem Muster der entstehenden Banden kann man dann die Abfolge der Basen auf dem DNA-Abschnitt ablesen.

== Einzelnachweise ==
<references />

[[Kategorie:Stoffgruppe]]
[[Kategorie:Oxolan| Didesoxyribonukleosid-Triphosphate]]
[[Kategorie:Diphosphat| Didesoxyribonukleosid-Triphosphate]]
[[Kategorie:Phosphorsäureester| Didesoxyribonukleosid-Triphosphate]]
[[Kategorie:Stickstoffhaltiger ungesättigter Heterocyclus]]
[[Kategorie:Nukleotid]]

Didesoxyribonukleosid-Triphosphate - Versionsgeschichte

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